茶多酚(tea polyphenols)是茶叶中的检测一类重要的粉末生物活性物质,包括儿茶素(Catechins)、茶黄素(Theaflavins)、茶红素(Thearubigins)等。茶多酚具有抗氧化、抗菌、抗炎、抑制肿瘤等多种生理活性作用。因此,测定茶叶中茶多酚含量对于品质评定和功能性研究具有重要意义。
测定茶叶中茶多酚含量可以采用比色法,其原理是将茶多酚与鞣酸盐(如石酸钾镁,PDM)反应生成具有颜色的浸提络合物,通过比色法测定络合物的进一步光吸收度来间接测定茶多酚的定法含量。
实验步骤如下:
1.制备鞣酸盐溶液:将0.7g石酸钾镁溶解在500ml去离子水中,称为鞣酸盐溶液。
2.取适量的目的茶叶样品:将茶叶样品粉碎并过筛,取约0.5g茶叶样品。
3.提取茶叶中的高锰酸钾茶多酚:将0.5g茶叶样品加入100ml95%乙醇中,超声提取30分钟。离心10分钟,取上清液。
4.标准曲线制备:取一系列浓度已知的掌握茶多酚标准溶液,分别加入等体积的易溶鞣酸盐溶液中,使最终浓度分别为0、0.02、0.04、0.06、0.08和0.1mg/ml。测定这些溶液的热水吸光度,绘制标准曲线。
5.测定茶叶提取液的亚铁吸光度:取提取液适量(使茶多酚的直接浓度在标准曲线范围内),加入等体积的蓝色鞣酸盐溶液中,充分混合,放置30分钟。用紫外可见分光光度计测定络合物溶液的高效吸光度。
6.计算茶叶中茶多酚的液相色谱法含量:根据标准曲线,确定茶叶提取液中茶多酚的成分浓度,根据提取液的色谱体积和茶叶样品的工艺质量,计算茶叶中茶多酚的一定含量。
需要注意的酚类是,茶叶中茶多酚的形成浓度受多种因素的表示影响,如茶叶品种、生长环境、采摘季节等,因此,实验中所得到的条件茶多酚含量只能作为一个参考值。为了保证测定结果的配制准确性,应该重复测定多次,并进行统计分析。另外,茶叶中茶多酚含量的试剂测定方法还有很多种,可根据实际情况选择合适的叶茶方法和技术。
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